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小鼠中性粒細(xì)胞趨化因子-1elisa檢測(cè)試劑盒?操作流程

發(fā)布時(shí)間:2024-04-24
小鼠中性粒細(xì)胞趨化因子-1elisa檢測(cè)試劑盒操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,最終測(cè)得的od值為兩者之差(w1-w2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(s)和陰性對(duì)照(n)的 od值后,計(jì)算s/n值。s/n≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族12抗體
鈉鉀atp酶通道蛋白抗體
agxt2l2蛋白抗體
β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體
錨蛋白重復(fù)及sam結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體
二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶5抗體
腺苷單磷酸脫氨酶1抗體
紅細(xì)胞蛋白ank1抗體
腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體
α1b糖蛋白抗體
載脂蛋白b-mrna編碼蛋白抗體
凋亡誘導(dǎo)因子3抗體
凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體
凋亡誘導(dǎo)蛋白d抗體
酸性神經(jīng)鞘磷脂酶抗體
腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體
atp酶h+轉(zhuǎn)運(yùn)溶酶體輔助蛋白2抗體
肝素結(jié)合蛋白/陽(yáng)離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體
核突觸蛋白抗體
β-肌動(dòng)蛋白/β-actin 抗體(內(nèi)參抗體)
β淀粉樣肽1-42(c端)/β-amyloid 1-42 (ct)抗體
β淀粉樣肽1-16/aβ1-16抗體
關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱
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