擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是液相色譜儀的心臟,柱效高、選擇性好、分析速度快是對(duì)色譜柱的一般要求。商品化hplc微粒填料,粒度通常為3µm、5µm、7µm及10µm。超高壓液相色譜中采用的固定相粒度甚至可以小到1µm,而制備色譜所采用的固定相粒度通常大于10µm。
填充hplc柱柱效的理論值可達(dá)到每米50000~160000理論塔板數(shù)。每米5000理論塔板數(shù)柱效的色譜柱即可滿足一般樣品分析的要求。較難分離的樣品可能需每米20000理論塔板數(shù)柱效的柱子,因此采用100~300mm的柱長(zhǎng)就能滿足大多數(shù)樣品分析的需要。
液相色譜柱可依柱徑大致分為三種類型:內(nèi)徑小于2mm的稱為細(xì)管徑柱或微管徑柱;內(nèi)徑在2~5mm的是常規(guī)液相色譜柱;內(nèi)徑大于5mm的稱為半制備柱或制備柱。細(xì)管徑柱中流動(dòng)相流量小,體積峰寬隨之減少,也減小了對(duì)樣品的稀釋,有利于提高峰高靈敏度。另一方面,細(xì)管徑柱柱體積小,柱外效應(yīng)的影響將不容忽視,需要配備更小池體積的檢測(cè)器和小流量泵,對(duì)柱接頭、連接管以及進(jìn)樣設(shè)備也有更高要求。
關(guān)鍵詞:色譜柱 液相色譜儀