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細(xì)胞貼壁培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)及培養(yǎng)系統(tǒng)

發(fā)布時(shí)間:2024-04-24
生長(zhǎng)特性
貼壁依賴型細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)要貼附于培養(yǎng)(瓶)器皿壁上,細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展,然后開(kāi)始有絲分裂,并很快進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。一般數(shù)天后就鋪滿培養(yǎng)表面,并形成致密的細(xì)胞單層。
折疊編輯本段貼壁培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)
●容易更換培養(yǎng)液;細(xì)胞緊密黏附于固相表面,可直接傾去舊培養(yǎng)液,清洗后直接加入新培養(yǎng)液。
●容易采用灌注培養(yǎng),從而達(dá)到提高細(xì)胞密度的目的;因細(xì)胞固定表面,不需過(guò)濾系統(tǒng)。
●當(dāng)細(xì)胞貼壁于生長(zhǎng)基質(zhì)時(shí),很多細(xì)胞將更有效的表達(dá)一種產(chǎn)品。
●同一設(shè)備可采用不同的培養(yǎng)液/細(xì)胞的比例。
●適用于所有類型細(xì)胞。
3.貼壁培養(yǎng)的缺點(diǎn):與懸浮培養(yǎng)法相比
●擴(kuò)大培養(yǎng)比較困難,投資大;
●占地面積大;
●不能有效監(jiān)測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng);
折疊編輯本段細(xì)胞貼壁的表面
要求具有凈陽(yáng)電荷和高度表面活性。對(duì)微載體而言還要求具一定電荷密度;若為有機(jī)物表面,必須具有親水性,并帶陽(yáng)電荷。
折疊編輯本段貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)
主要有轉(zhuǎn)瓶、中空纖維(后面專題介紹)、玻璃珠、微載體系統(tǒng)(后面介紹)等。
●轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)系統(tǒng):培養(yǎng)貼壁依賴型細(xì)胞最初采用轉(zhuǎn)瓶系統(tǒng)培養(yǎng)。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)一般用于小量培養(yǎng)到大規(guī)模培養(yǎng)的過(guò)渡階段,或作為生物反應(yīng)器接種細(xì)胞準(zhǔn)備的一條途徑。細(xì)胞接種在旋轉(zhuǎn)的圓筒形培養(yǎng)器-轉(zhuǎn)瓶中,培養(yǎng)過(guò)程中轉(zhuǎn)瓶不斷旋轉(zhuǎn),使細(xì)胞交替接觸培養(yǎng)液和空氣,從而提供較好的傳質(zhì)和傳熱條件。
轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,投資少,技術(shù)成熟,重復(fù)性好,放大只需簡(jiǎn)單的增加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等優(yōu)點(diǎn)。
但也有其缺點(diǎn):勞動(dòng)強(qiáng)度大,占地空間大,單位體積提供細(xì)胞生長(zhǎng)的表面積小,細(xì)胞生長(zhǎng)密度低,培養(yǎng)時(shí)監(jiān)測(cè)和控制環(huán)境條件受到限制等。
轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)系統(tǒng)包括二氧化碳培養(yǎng)箱和轉(zhuǎn)瓶機(jī)兩類。
●反應(yīng)器貼壁培養(yǎng)此種培養(yǎng)方式中,細(xì)胞貼附于固定的表面生長(zhǎng),不因?yàn)閿嚢瓒S培養(yǎng)液一起流動(dòng),因此比較容易更換培養(yǎng)液,不需要特殊的分離細(xì)胞和培養(yǎng)液的設(shè)備,可以采用灌流培養(yǎng)獲得高細(xì)胞密度,能有效地獲得一種產(chǎn)品;但擴(kuò)大規(guī)模較難,不能直接監(jiān)控細(xì)胞的生長(zhǎng)情況,故多用于制備用量較小、價(jià)值高的生物藥品。
celligen、celligen plustm和bioflo3000反應(yīng)器是常用的貼壁培養(yǎng)式生物反應(yīng)器,用于細(xì)胞貼壁培養(yǎng)時(shí)可用籃式攪拌系統(tǒng)和圓盤狀載體。此載體是直徑6毫米無(wú)紡聚酯纖維圓片,具很高表面積與體積比(1200cm2/g),利于獲得高細(xì)胞密度?;@式攪拌系統(tǒng)和載體培養(yǎng)是貼壁細(xì)胞培養(yǎng)使用最多方式,用于雜交瘤細(xì)胞、hela細(xì)胞、293細(xì)胞、cho細(xì)胞及其它細(xì)胞培養(yǎng)。此種方式培養(yǎng)細(xì)胞,細(xì)胞接種后貼壁快。
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