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小鼠elisa檢測試劑盒試驗標本收集方法

發(fā)布時間:2024-04-24
小鼠elisa檢測試劑盒試驗標本收集方法
1、將抗原和淋巴細胞在體外混合,刺激并預孵育,是通用的方法。預孵育的淋巴細胞,在置入elispot板之前應使用復溫到37℃的培養(yǎng)液清洗細胞1-2次。置入elispot板以后通常在37℃培養(yǎng)5~6小時。
2、對于高度特異性抗原,可以采用將淋巴細胞和抗原同時加入elispot板孔中,37℃培養(yǎng)箱中,同步進行刺激、培養(yǎng)、和細胞因子捕獲。淋巴細胞板內(nèi)同步刺激培養(yǎng)的時間通常為22~24小時。
3、elispot試驗檢測的是每一個分泌細胞因子的活化細胞。在培養(yǎng)細胞過程中,任何移動、震動(包括開關培養(yǎng)箱門)都會導致細胞在培養(yǎng)板上的移動,從而得到不規(guī)則斑點或者斑點花紋,影響zui終結(jié)果。因此細胞在elispot培養(yǎng)板孵育的過程中,應注意保持培養(yǎng)板的靜置,不應對其移動。
4、在使用抗原刺激淋巴細胞培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變黃,這種現(xiàn)象通常見于使用很強的多克隆抗原刺激淋巴細胞,某些多克隆抗原會導致淋巴細胞凋亡或者死亡,大量淋巴細胞死亡后使培養(yǎng)液變黃。使用這些淋巴細胞進行后續(xù)elispot試驗通常得到很低的斑點(spot)形成。換用特異性抗原后可以避免該現(xiàn)象。
5、在elispot結(jié)果中出現(xiàn)不規(guī)則的大塊斑點,有的區(qū)域沒有斑點的原因,不規(guī)則斑點區(qū)域的出現(xiàn)一般是細胞分離不*所至,有時候采用多克隆抗原孵育的淋巴細胞也會產(chǎn)生成團現(xiàn)象。請確認加入到elispot板中進行孵育的是單細胞懸液。
6、使用開口較大的吸頭,動作輕柔,避免對細胞的吹打,減少剪切力對淋巴細胞的傷害。
小鼠elisa檢測試劑盒熱休克蛋白27(hsp-27)elisa試劑盒 ,英文名: hsp-27 elisa kit
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熱休克蛋白22(hsp-22)elisa試劑盒 ,英文名: hsp-22 elisa kit
熱休克蛋白20(hsp-20)elisa試劑盒 ,英文名: hsp-20 elisa kit
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