一、標(biāo)樣配置
氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:含有天冬氨酸、等17種常見(jiàn)組成蛋白質(zhì)的氨基酸。
17種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品
行號(hào)
氨基酸
行號(hào)
氨基酸
1
asp
天冬氨酸
2
thr
3
ser
4
glu
5
pro
6
gly
7
ala
8
cys
9
val
10
met
蛋氨酸
11
ile
異
12
leu
13
tyr
14
phe
苯
15
his
16
lys
賴氨酸
17
arg
18
二、分析方法描述(biochrom 30+)
1) 色譜柱:biochrom na型陽(yáng)離子交換樹脂柱,4.6′20cm
2) 運(yùn)行時(shí)間:常規(guī)分析時(shí)間+再生時(shí)間56min
3) 反應(yīng)單元溫度:135°c。
4) 分離程序:
no.
time
temp
buffer
pump
nin
rec
commands
1
01:00
48
1
35.0ml/h
on
off
2
00:00
48
1
35.0ml/h
on
off
reset
3
01:00
48
1
35.0ml/h
on
off
load
4
06:40
48
1
35.0ml/h
on
on
5
13:00
52
2
35.0ml/h
on
on
6
01:00
52
5
35.0ml/h
on
on
7
16:00
95
5
35.0ml/h
on
on
8
04:00
95
6
35.0ml/h
on
on
9
04:00
95
1
35.0ml/h
on
on
10
09:00
48
1
43.0ml/h
off
off
11
02:00
48
1
35.0ml/h
on
off
end
三、蛋白水解圖譜優(yōu)化
四、蛋白水解圖譜優(yōu)化原理及方法
biochrom 30+系列提供的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物程序可能需要稍做改動(dòng)以達(dá)到在蛋白水解產(chǎn)物標(biāo)準(zhǔn)中的氨基酸分離,影響氨基酸分離的因素是:
緩沖液和有機(jī)溶劑的ph值和克分子濃度
緩沖液時(shí)間
分析柱溫度
緩沖液流速
樹脂床長(zhǎng)度