1.小鼠單克隆抗體
小鼠單克隆抗體是由激活的b淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞產(chǎn)生的，既能分泌抗體又能無限增殖的鼠源單克隆抗體。
2.小鼠單克隆抗體制備方法卡梅德生物能夠為客戶提供兩種方式的小鼠單克隆抗體制備服務(wù)，一種是利用噬菌體抗體展示技術(shù)制備重組單克隆抗體；另一種是利用細胞融合技術(shù)制備雜交瘤細胞系。
傳統(tǒng)單克隆抗體技術(shù)是指由骨髓瘤細胞和分泌抗體的b淋巴細胞融合（全人源單克隆抗體制備技術(shù)除外）后形成雜交瘤細胞并分泌單克隆抗體，由于其只作用于抗原復(fù)合分子上某一抗原決定簇，因此具有專一性強、效價高等特點。
3.小鼠單克隆抗體制備優(yōu)點小鼠是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中常見的模式動物之一，鼠單抗也是常用的單克隆抗體，具有特異性強，可快速、大量、連續(xù)生產(chǎn)等優(yōu)勢。
4.卡梅德生物多種鼠單抗優(yōu)勢產(chǎn)品
基于成熟的抗體平臺體系建設(shè)，卡梅德生物目前生產(chǎn)有多種類型的鼠單抗產(chǎn)品。其中標(biāo)簽抗體如hrp標(biāo)記小鼠抗人igg(fc)（cat：sa2265），動物疫病抗體如小鼠抗豬偽狂犬單克隆抗體（cat：anab1024），小分子抗體如青霉素小鼠單抗（cat：pa042），用于wb、elisa檢測等多種項目。
5.卡梅德生物可以提供高質(zhì)量的小鼠單克隆抗體制備服務(wù)
卡梅德生物提供的小鼠單克隆抗體制備服務(wù)，流程主要包括：抗原制備-小鼠免疫-細胞融合-細胞篩選-細胞亞克隆-腹水生產(chǎn)-腹水純化。
5.1抗原準備
客戶提供抗原，可接受蛋白，多肽以及各種小分子抗原，和弗氏佐劑一起混合進行免疫。
5.2小鼠免疫
準備5只balb/c小鼠，間隔14天進行免疫源注射，采血進行效價檢測。
5.3細胞融合、篩選和亞克隆
選取血清效價滿足要求（蛋白/病毒>105；多肽/小分子>104）的小鼠脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合，有限稀釋融合細胞，96孔板克隆化， hat篩選雜交瘤細胞，經(jīng)免疫原檢測，挑選1-10個陽性克隆，進行亞克隆擴大培養(yǎng)到96孔板， elisa篩選陽性亞克隆，并進行擴大培養(yǎng)，小鼠經(jīng)過融合、有限稀釋法的一次克隆及上清檢測，得到多株符合項目要求的細胞株，選擇4個細胞株進行后續(xù)腹水制備。
5.4腹水抗體純化
客戶選取的雜交瘤細胞制備腹水，protein a/g法進行腹水純化。
5.4.1 蛋白a/g-sepharose柱的處理
1)選擇合適的層析柱，清洗干凈，并垂直固定在鐵架臺上。
2)取適量的蛋白g-sepharose的乙醇懸浮液，靜置等膠沉淀后吸去上層乙醇，再用結(jié)合緩沖液多次懸浮洗去乙醇。
3)將結(jié)合緩沖液與蛋白a/g混合成50-70%的漿狀物，把漿狀物倒入柱內(nèi)。
4)連接蠕動泵，以50cm/h（對于直徑1cm的柱相當(dāng)于0.7ml/min）的速率裝柱，待柱體沉降后，繼續(xù)用5～10倍體積的結(jié)合緩沖液清洗柱體。
5.4.2 樣品處理與上樣
1)腹水樣品 12,000×g，離心10min后，取上清進行0.45μm孔徑過濾。
2)上樣:將過濾好的樣品液以0.4ml/min流速加入親和柱內(nèi)。
3)樣品進入介質(zhì)后，將流速調(diào)低至0.7ml/min，繼續(xù)用10倍體積結(jié)合緩沖液清洗，直到a280值恢復(fù)到本底水平（＜0.02）。
5.4.3 樣品洗脫
1)保持速率不變，換洗脫緩沖液洗脫結(jié)合在柱中的抗體，洗脫液以2ml為洗脫組分分部收集（2ml/管）。收集試管中要加入0.1ml中和緩沖液，以便及時中和洗脫所得抗體液的ph值。
2)檢測每管的a280，當(dāng)a280<0.05時停止洗脫，匯集a280大于等于0.2的峰組分。
3)若需要除去鹽分或改變緩沖液，可以在磷酸鹽緩沖液（pbs）中透析，或在其它特定的溶液中透析。
5.4.4 純度鑒定
電泳：取純化好的蛋白按照4:1比例加入5xloading buffer后100℃煮樣10min，取10ul上樣進行sds-page電泳：120v，90分鐘后，考馬斯亮藍染色30min后進行脫色。
5.5交付
卡梅德生物交付3-5株陽性克隆株，高特異性與高親和性的小鼠單克隆純化抗體，實驗報告和鑒定報告：包括sds-page、elisa檢測等結(jié)果，并根據(jù)客戶需求，提供抗體驗證結(jié)果，如western blot、ihc、ip、if等。
小鼠單克隆抗體是常用的單克隆抗體之一，在腫瘤診斷治療、細胞表面抗原檢測、機體微量成分測定等領(lǐng)域大量應(yīng)用。因此制備高特異性、大規(guī)模生產(chǎn)的抗體是科研用戶的主要需求。卡梅德生物積累了充足的抗體制備經(jīng)驗和專業(yè)技術(shù)，可為您提供鼠單抗定制完整的上下游服務(wù)。