在elisa檢測(cè)系統(tǒng)的關(guān)鍵要素中，包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別，所以保留抗原很重要，做重組蛋白時(shí)，一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑，從而排斥elisa后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。但有時(shí)因?yàn)樵囼?yàn)的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來(lái)包。
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)。該法適于測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清、血漿及組織液中的樣本，干擾小可以測(cè)到每毫升納克水平的細(xì)胞因子(或受體)的水平。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體；②酶標(biāo)記的抗原或抗體；③酶作用的底物。
根據(jù)elisa試劑盒試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
(1) 雙抗體夾心法；
(2) 雙位點(diǎn)一步法；
(3) 間接法測(cè)抗體；
(4) 競(jìng)爭(zhēng)法；
(5) 捕獲法測(cè)igm抗體；
(6) 應(yīng)用親和素和生物素。
試劑盒普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗(yàn)。在這種方法中，通常標(biāo)準(zhǔn)配體是固定的，通過(guò)加入溶液相受體或蛋白質(zhì)來(lái)使之成鍵。通過(guò)加入與受體特異性反應(yīng)的抗體來(lái)定量成鍵的受體，而且zui初抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測(cè)量。第二種抗體能識(shí)別抗體的末端，在其末端的堿性磷酸酯或過(guò)氧化物酶等與酶發(fā)生反應(yīng)，從而使溶液顯色。