小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白雙抗原夾心法檢測抗體
雙抗原夾心法的反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物,以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測定,因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗hbs的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,尋找合適的標(biāo)記方法。
雙抗原夾心法的簡要操作步驟為:
1)先加入抗原,使抗體固定結(jié)合于載體表面;
2)再加樣品,使目標(biāo)檢測抗體形成抗原-抗體復(fù)合物;
3)加酶標(biāo)抗原;
4)加入酶促反應(yīng)底物,發(fā)生顯色反應(yīng),顯色的深淺與待測抗體的量成正比。