穩(wěn)定細(xì)胞有哪些？
屬于穩(wěn)定細(xì)胞的是腎小管上皮細(xì)胞及肝細(xì)胞。神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞屬于永jiu性細(xì)胞。男性及女性生殖管道被覆上皮細(xì)胞、淋巴造血細(xì)胞、表皮細(xì)胞都是不穩(wěn)定細(xì)胞。
穩(wěn)定細(xì)胞（stable cells)又稱靜止細(xì)胞（quiescent cell)。在生理情況下，這類細(xì)胞增殖細(xì)胞不明顯，在細(xì)胞增殖周期中處于靜止（g0），但受到組織損傷的刺激時(shí)，則進(jìn)入dna合成前期（g1），表現(xiàn)出較強(qiáng)的再生能力。這類細(xì)胞包括各種腺體或腺樣器官的實(shí)質(zhì)細(xì)胞，如胰、涎腺、內(nèi)分泌腺、汗腺、皮脂腺和腎小管的上皮細(xì)胞等，由其構(gòu)成的組織處于分裂期的細(xì)胞低于1.5%。此類組織中的內(nèi)分泌腺和上皮無干細(xì)胞存在。
穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的構(gòu)建有哪些原理及方法？
穩(wěn)轉(zhuǎn)株即穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株，指基于某一細(xì)胞系構(gòu)建的持續(xù)過表達(dá)或干擾某特定基因的細(xì)胞系。
穩(wěn)轉(zhuǎn)株的優(yōu)勢(shì)：
①通過建立穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系，可以降低頻繁轉(zhuǎn)染或者病毒包裝的成本，方便在目的細(xì)胞中研究基因功能實(shí)驗(yàn)研究；
②區(qū)別于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染只能干擾表達(dá)，無法去除已表達(dá)的目的蛋白，構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系可以實(shí)現(xiàn)更好的基因干擾效果；
③瞬轉(zhuǎn)會(huì)引入拷貝數(shù)的表達(dá)，導(dǎo)致因人為因素造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不精確，建立穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系可以幫助篩選拷貝數(shù)適量的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究；
④需要用誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的，主要是一些致死基因或者是需要時(shí)空表達(dá)的。
穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建原理：
通過將外源dna/shrna克隆到帶有某種抗性基因的載體上，重組載體被轉(zhuǎn)染至宿主細(xì)胞并整合到其染色體中，并能隨細(xì)胞分裂穩(wěn)定傳遞下去，再用載體中所含抗性基因進(jìn)行篩選。
穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建方法：
目前常用到的方法有脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染和病毒轉(zhuǎn)染，病毒有慢病毒（lentivirus），腺病毒（adenovirus），逆轉(zhuǎn)錄病毒（retrovirus）。
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