和其它分析儀器一樣,若想讓高效液相色譜儀很好地為你工作,首先要保養(yǎng)好它,總結(jié)保養(yǎng)的三要點(diǎn):脫氣、過濾和沖洗。
一、脫氣
流動(dòng)相脫氣對于避免hplc系統(tǒng)出問題、順利得到一個(gè)理想的數(shù)據(jù)是一個(gè)很有效的措施。常用的脫氣方法有如下幾種:
1、吹氦脫氣法:
利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性,在0.1mpa壓力下,以約60 ml/min流速通入流動(dòng)相儲液容器中10~15min,可以很有效地從流動(dòng)相中排除溶解的空氣,能排除接近80%的氧氣。
2、加熱回流法:
此法的脫氣效果較好。在操作時(shí)要注意冷凝塔的冷卻效率,否則溶劑會丟失,混合流動(dòng)相的比例會有變化。
3、抽真空脫氣法:
此法可使用真空泵,降壓至0.05~0.07mpa即可除去溶解的氣體。但是由于真空脫氣會使混合溶劑組成發(fā)生變化,從而影響到實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性,因此多用于單溶劑體系的簡單分析。
4、在線脫氣法:
現(xiàn)在商品的hplc儀器,均可配在線脫氣機(jī),在線脫氣使用簡單,低故障,有效。
二、過濾
任何顆粒物進(jìn)入hplc系統(tǒng)后都會在柱子入口端被篩板擋住,最后的結(jié)果是將柱子堵塞,表現(xiàn)出的特征是系統(tǒng)壓力增加并使色譜峰變形。因此,要采取各種預(yù)防措施,努力防止或減少顆粒物進(jìn)入hplc系統(tǒng)中,從而延長儀器和色譜柱的使用壽命,并提高數(shù)據(jù)的可靠性。
三、沖洗
使hplc系統(tǒng)良好運(yùn)行的第三個(gè)要點(diǎn)是保持系統(tǒng)的清潔。以下幾個(gè)部位需要經(jīng)常沖洗。
1、流動(dòng)相儲液瓶
首先要經(jīng)常清洗流動(dòng)相儲液瓶,或者每做一批新樣品更換一次流動(dòng)相。一個(gè)臟的儲液瓶將會污染注入的流動(dòng)相。建議儲液瓶中緩沖液使用時(shí)間不要超過一周,而有機(jī)溶劑使用時(shí)間不要超過一個(gè)月。
2、泵
接下來要沖洗的是泵。千萬不要一分析完沖幾分鐘后就停泵,在停泵以前一定要用非緩沖液流動(dòng)相沖洗泵在半個(gè)小時(shí)以上,要是流動(dòng)相中有難揮發(fā)緩沖鹽則建議沖洗的時(shí)間應(yīng)該更長些。
3、自動(dòng)進(jìn)樣器
自動(dòng)凈樣器也要按規(guī)定清洗?,F(xiàn)在的儀器多配有自動(dòng)進(jìn)樣器的沖洗液瓶,通常只要注意及時(shí)更換、補(bǔ)充沖洗液即可。
4、色譜柱
對柱子的污染是隨使用時(shí)間而增加。用梯度沖洗效果更好,具體的比例要根據(jù)柱子的說明書和性質(zhì)而定。
5、檢測器
如果是正常使用,檢測器將依據(jù)其性質(zhì)并按照說明書規(guī)定進(jìn)行洗。