小鼠雜交瘤細胞特性:1)細胞來源于人胎盤組織。2)細胞鑒定:血小板-內(nèi)皮細胞粘附分子(pecam-1/cd31)或血管假性血友病因子(vwf)免疫熒光染色為陽性。3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。4)不含有hiv-1、hbv、hcv、支原體、細菌、酵母和真菌。5)細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。
小鼠雜交瘤細胞操作步驟:1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、pbs放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量pbs潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
關(guān)鍵詞:水浴鍋 顯微鏡