大鼠補體成分5(c5)elisa試劑盒實驗步驟
hrp的制備
1).水提取:稱取5kg用水沖刷干凈的鮮辣根(辣根皮中亦含有豐富的hrp),用菜刀切成小碎塊,在絞肉機中絞碎1~2次。碎渣漿用1倍體積的水低溫下攪拌提取(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干機(或離心機)甩干,收集濾液,碎渣再用1/4倍體積水浸泡提取1次,合并2次濾液,測得總體積。
2). 大鼠補體成分5(c5)elisa試劑盒硫酸銨分級分離:在不斷攪拌下,每1000ml濾液中慢慢加入226g硫酸銨粉末(相當于0.40飽和度,0℃),大約在1~2h內加完,置冷室中放置。次日將上清液小心地用虹吸管移出,下面混濁液以3 000r/min離心15min,棄沉淀,合并上清液。再按每1000ml上清液加258g硫酸銨粉末(0.8飽和度)隨加隨攪拌,當硫酸銨全部溶解后,置冷室。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰凍離心機中以13000r/min離心20min,棄去上清液,收集沉淀。將沉淀懸浮于100~150ml蒸餾水中(加水量要使沉淀全部溶解為止),分裝于透析袋內,放在流動自來水中進行透析1~2天,直到硫酸銨透析完畢為止(可用5%乙酸鋇溶液或奈氏試劑進行檢查)。然后改換成用蒸餾水透析,中間更換2~3次,用0.1mol/l*溶液檢查透析外液無氯離子為止。將透析液合并,在冰凍離心機中以4 000r/min離心15min,棄去沉淀,量上清液的體積。
3). 大鼠補體成分5(c5)elisa試劑盒丙酮分級分離:將上清液倒入燒杯并置冰鹽浴中,在不斷攪拌下,用細滴管沿杯壁加入1倍體積預冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰凍離心機中以4000r/min離心15min,棄去沉淀。上清液再加入0.8體積(按原上清液體積)-15℃丙酮,(操作同上),靜置后,在冰凍離心機中離心收集沉淀。將沉淀溶于少量蒸餾水中,透析除去丙酮??傻胷z值近于1的酶溶液。
4). 大鼠補體成分5(c5)elisa試劑盒精制:將上步酶液適當稀釋,滴加1mol/l硫酸鋅溶液,使酶液中鋅離子濃度為10 -3 mol/l,5 000r/min離心10min,得上清液。再將沉淀用少量蒸餾水洗滌,離心,洗液與清液合并,分裝于透析袋內,用水透析除鹽,用微孔濾膜過濾,進行真空冰凍干燥(約得20mg),產品呈米黃色纖維狀松軟物,hrp產品的rz值可達3.0左右,置真空干燥器中低溫保存。xyb049ra 大鼠三葉因子1(tff1)elisa試劑盒價格96t/48t elisa kit for trefoil factor 1 (tff1)
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superfamily, member 5 (tnfrsf5)
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(cpt1a)
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xyd880ra 大鼠胰島素受體底物2(irs2)elisa試劑盒價格96t/48t elisa kit for insulin receptor substrate 2 (irs2)
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