新生牛血清是通過(guò)對(duì)出生12-24小時(shí)新生牛進(jìn)行靜脈采血而得到的血清。新生牛血清中營(yíng)養(yǎng)豐富,蛋白含量和各種生長(zhǎng)因子都較高,價(jià)格較胎牛血清低得多,是目前動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中極為常用的血清。
一、新生牛血清特點(diǎn):
1、來(lái)自通過(guò)心臟穿刺新生牛無(wú)菌收集的凝結(jié)的血液,是高鐵和高鐵傳遞蛋白水平的新生牛血清。
2、每個(gè)批次都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的控制和測(cè)試,新生牛血清批次間的差異小,質(zhì)量均一。
3、新生牛血清是無(wú)菌過(guò)濾的,并且ph值是中性的,適合于細(xì)胞的生長(zhǎng)。
4、廠家對(duì)新生牛血清進(jìn)行內(nèi)毒素檢查,超過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。介質(zhì)不大于0.625歐/毫升,不含病毒制劑。
5、新生牛血清是由各種大小的生物分子和不同激素濃度組成的復(fù)雜混合物,營(yíng)養(yǎng)豐富。
二、新生牛血清保存方法:
1、長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?br>2、一般廠商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾**。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。
3、血清解凍: 瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
三、解凍血清注意事項(xiàng):
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
1.解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2o℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
2.解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生
3.請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
4.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。
5.若必須做血清的熱滅活,新生牛血清請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。