hilic色譜柱為色譜工作者在日常lc方法開發(fā)工作中考察不同acquity uplc色譜柱的分離選擇性而設(shè)計。我們設(shè)計acquity uplc hss c18 色譜柱用于在低ph流動相條件下分離堿性化合物和非堿性化合物組成的混合物,同現(xiàn)代高c18覆蓋率和*端基封尾的c18柱相比,這款色譜柱能夠提供*不同的分離選擇性。對柱子長短的選擇:由于分辨率與柱長的平方根成正比。柱子長,則提高分辨率。一般來說:15m的短柱用于快速分離較簡單的樣品,也適于快速成分掃描分析;30m的hilic色譜柱是常用的柱長,大多數(shù)分析在此長度的柱子上完成;50m、60m或更長的氣相hilic色譜柱/氣象色譜柱用于分離比較復(fù)雜的樣品。一般,初次使用氣相色譜儀的朋友對色譜柱不知怎樣合理配置氣相色譜柱/氣象hilic色譜柱,總希望氣相色譜柱/氣象色譜柱越多越好,盲目購置許多柱子或固定液、擔體等,結(jié)果有許多閑置造成浪費。專家就此向大家推薦一些值得考慮的經(jīng)驗。
hilic色譜柱從多年的經(jīng)驗來談起,一般準備幾個柱子就基本可以解決各類氣相色譜分析工作的要求,可優(yōu)先選擇固定液分別為se-30(或者ov-101)、ov-17、peg-20m、degs、ffap的柱子各一個。hilic色譜柱對于填充柱,擔體可選白色擔體、紅色擔體(包括未酸洗、酸洗、硅烷化)、gdx系列(或者porapak系列)三種,基本可以解決工作中絕大部分項目。
對于口徑的選擇:hilic色譜柱柱徑直接影響柱子的效率、保留特性和樣品容量。小口徑柱比大口徑柱有更高柱效,但柱容量更小。
0.25mm:具有較高的柱效,柱容量較低。分離復(fù)雜樣品較好。
0.32mm:柱效稍低于0.25mm的hilic色譜柱,但柱容量約高60%。
0.53mm:具有類似于填充柱的柱容量,可用于分流進樣,也可用于不分流進樣,當柱容量是主要考慮因素時(如痕量分析),選擇大口徑毛細管柱較為合適。專家認為,對于普通用戶,可選30米或50米長的毛細管,口徑選0.32mm較為便利。
我們是如何設(shè)計hilic色譜柱達到這樣的效果呢?專門研究色譜填料的科學(xué)家們在hss硅膠基體上采用三鍵鍵合技術(shù),鍵合了中等配體密度(約1.6 μmol/m2)的c18配體,而且沒有對游離硅羥基進行端基封尾。一般來說,同現(xiàn)代的高c18覆蓋率*端基封尾的c18hilic色譜柱相比,較高活性的硅羥基將增強堿性化合物的保留,而中等c18配體密度能夠?qū)Ψ菈A性化合物產(chǎn)生較弱(或相當)的保留。從色譜理論分析,hilic色譜柱這種*的鍵合和端基封尾組合將成為復(fù)雜uplc分離方法開發(fā)工作中一個實用且方便的工具。