瓊脂糖是實驗室常用的試劑之一，但是瓊脂糖凝膠電泳的制備過程也不簡單，接下來就為大家詳細介紹一下制備過程。一、用稱量紙片電子天平取0.3g的瓊脂粉；二、配30ml的1*10的tbst緩沖液與100ml的三角燒瓶里；三、倒入瓊脂粉搖勻，并轉(zhuǎn)到微波爐中加熱溶解；四、用手套取出到?jīng)鏊陨粤罌鲋翜責岷螅s60℃），加入核酸酶（eb替代物）2ul；要邊加邊搖勻，使之充分搖勻；五、取電泳槽內(nèi)的有機玻璃內(nèi)槽(制膠槽)洗干凈,晾干，放入制膠玻璃板.取透明膠帶將玻璃板與內(nèi)槽兩端邊緣封好，形成模子。將內(nèi)槽置于水平位置,并在固定位置放好梳子.將冷卻到65℃左右的瓊脂糖凝膠液混勻小心地倒入內(nèi)槽玻璃板上，使膠液緩慢展開，直到整個玻璃板表面形成均勻膠層。室溫下靜置直至凝膠凝固,垂直輕拔梳子，取下膠帶，將凝膠及內(nèi)槽放入電泳槽中。注意：制備過程中請戴好手套；梳齒處不可存在氣泡，液面應(yīng)保持平整無波紋。
開始跑膠一、膠凝后取膠放到電泳槽中，倒入電泳液至浸過凝膠。二、從冰箱中取出mark和loading buffer，加入6ulloading buffer到樣品中混勻；然后用加樣槍分別加到凝膠的大孔中（要緩慢加，不要穿破凝膠，最后槍不要打盡以至于有空氣使樣品吹打出來）；mark加到小孔中的任一孔（記住位置）。三、蓋上電泳槽，加樣后的凝膠板立即通電進行電泳，電壓60-100v，樣品由負極(黑色)向正極(紅色)方向移動，電壓升高，瓊脂糖凝膠的有效分離范圍降低，當溴酚藍移動到距離膠板下沿約1cm處時，停止電泳。四、使用凝膠成像儀拍照，觀察條帶（mark或樣品是否有條帶顯示）。
觀察方法電泳時間依據(jù)實驗的具體要求而定，在電泳中途可以使用紫外燈直接觀察，也可以根據(jù)指示劑確定條帶的遷移位置，各條區(qū)分開后電泳結(jié)束，取出凝膠直接檢測拍照。拿到膠體條帶圖譜后，找到marker，根據(jù)marker就可以確定目標條帶了。