（4-氨基*分光光度法）一、原理酚類化合物于ph10.0±0.2介質(zhì)中，在鐵***存在下，與4-氨基*反應(yīng)，生
（4-氨基*分光光度法）一、原理酚類化合物于ph10.0±0.2介質(zhì)中，在鐵***存在下，與4-氨基*反應(yīng)，生成橙紅色的吲哚酚氨基*染料，其水溶液在510nm波長(zhǎng)處有*大吸收。用光程長(zhǎng)為20mm比色皿測(cè)量時(shí)，酚的*低檢出濃度為0.1mg/l。二、儀器1．500ml全玻璃蒸餾器。2．分光光度計(jì)。三、試劑實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)為無酚水。1．無酚水：于1l水中加入0.2g經(jīng)200℃活化0.5h的活性炭粉末，充分振搖后，放置過夜。用雙層中速濾紙過濾，或加入氫氧化鈉使水呈強(qiáng)堿性，并滴加*溶液至紫紅色，移入蒸餾瓶中加熱蒸餾，收集餾出液備用。注：無酚水應(yīng)貯于玻璃瓶中，取用時(shí)應(yīng)避免與橡膠制品（橡皮塞或乳膠管）接觸。2．硫酸銅溶液：稱取50g硫酸銅（cuso4·5h2o）溶于水，稀釋至500ml。3．磷酸溶液：量取50ml磷酸（密度20℃=1.69g/ml），用水稀釋至500ml。4．甲基橙指示液：稱取0.05g甲基橙溶于100ml水中。*標(biāo)準(zhǔn)貯備液： 稱取1.00g無色*溶于水，移入1000ml容量瓶中，稀釋至標(biāo)線。至冰箱內(nèi)保存，至少穩(wěn)定一個(gè)月。標(biāo)定方法：(1)吸10.00ml酚貯備液于250ml碘量瓶中，加水稀釋至100ml，加10.0ml0.1mol/l溴酸鉀-*溶液，立即加入5ml鹽酸，蓋好瓶蓋，輕輕搖勻，于暗處放置10min。加入1g*，密塞，再輕輕搖勻，放置暗處5min。用0.0125mol/l*標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至淡黃色，加入1ml淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好褪去，記錄用量。(2)同時(shí)以水代替*貯備液作空白試驗(yàn)，記錄*標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溶液用量。(3)*貯備液濃度由下式計(jì)算：*（mg/ml）=15.68×c×(v1-v2)/v式中：v1——空白實(shí)驗(yàn)中*標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液用量(ml)；v2——滴定*貯備液時(shí)，*標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溶液用量（ml）;v——取用*貯備液體積(ml)；c——*標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度(mol/l)；15.68——1/6c6h5oh摩爾質(zhì)量(g/mol)。6．*標(biāo)準(zhǔn)中間液：取適量*貯備液，用水稀釋至每毫升含0.010mg*。使用時(shí)當(dāng)天配制。7．溴酸鉀-*標(biāo)準(zhǔn)參考溶液(c1/6kbro3=0.1mol/l)：稱取2.784g溴酸鉀(kbro3)溶于水，加入10g*(kbr),使其溶解，移入1000ml容量瓶中，稀釋至標(biāo)線。8．*標(biāo)準(zhǔn)參考溶液(c1/6kio3=0.0125mol/l)：稱取預(yù)先經(jīng)180℃烘干的*0.4458g溶于水，移入1000ml容量瓶中，稀釋至標(biāo)線。9．*標(biāo)準(zhǔn)溶液(cna2s2o3·5h2o≈0.0125mol/l)：稱取3.1g*溶于煮沸放冷的水中，加入0.2g碳酸鈉，稀釋至1000ml，臨用前，用*溶液標(biāo)定。標(biāo)定方法：取10.00ml*溶液置250ml容量瓶中，加水稀釋至100ml，加1g*，再加5ml(1+5)硫酸，加塞，輕輕搖勻。置暗處放置5min，用*溶液滴定至淡黃色，加1ml淀粉溶液， 繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛褪去為止，記錄*溶液用量。按下式計(jì)算*溶液濃度(mol/l)：c(na2s2o3·5h2o)=0.0125×v4÷v3式中：v3——*標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗量(ml)；v4——移取*標(biāo)準(zhǔn)參考溶液量(ml)；0.0125——*標(biāo)準(zhǔn)參考溶液濃度(mol/l)。10．淀粉溶液：稱取1g可溶性淀粉，用少量水調(diào)成糊狀，加沸水至100ml，冷后，置冰箱內(nèi)保存。11．緩沖溶液(ph約為10)：稱取20g氯化銨(nh4cl)溶于100ml氨水中，加塞，置冰箱中保存。注：應(yīng)避免氨揮發(fā)所引起ph值的改變，注意在低溫下保存和取用后立即加塞蓋嚴(yán)，并根據(jù)使用情況適量配置。12． 2%(m/v)4-氨基*溶液：稱取4-氨基*(c11h13n3o)2g溶于水，稀釋至100ml，置于冰箱中保存?？墒褂靡恢?。注：固體試劑易潮解、氧化，宜保存在干燥器中。13． 8%(m/v)鐵***溶液：稱取8g鐵***{k3[fe(cn)6]}溶于水，稀釋至100ml，置于冰箱內(nèi)保存?？墒褂靡恢?。四、測(cè)定步驟1．水樣預(yù)處理(1)量取250ml水樣置蒸餾瓶中，加數(shù)粒小玻璃珠以防暴沸，再加二滴甲基橙指示液，用磷酸溶液調(diào)節(jié)至ph4（溶液呈橙紅色），加5.0ml硫酸銅溶液(如采樣時(shí)已加過硫酸銅，則補(bǔ)加適量)。如加入硫酸銅溶液后產(chǎn)生較多量的黑色硫化銅沉淀，則應(yīng)搖勻后放置片刻，待沉淀后，再滴加硫酸銅溶液，至不產(chǎn)生沉淀為止。(2)連接冷凝器，加熱蒸餾，至蒸餾出約225ml時(shí)，停止加熱，放冷。向蒸餾瓶中加入25ml水，繼續(xù)蒸餾至餾出液為250ml為止。蒸餾過程中，如發(fā)現(xiàn)甲基橙的紅色褪去，應(yīng)在蒸餾結(jié)束后，再加1滴甲基橙指示液。如發(fā)現(xiàn)蒸餾后殘液不呈酸性，則應(yīng)重新取樣，增加磷酸加入量，進(jìn)行蒸餾。2．標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：于一組8支50ml比色管中，分別加入0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、10.00、12.50ml酚標(biāo)準(zhǔn)中間液，加水至50ml標(biāo)線。加0.5ml緩沖溶液，混勻，此時(shí)ph值為10.0±0.2，加4-氨基*1ml，混勻。再加1ml鐵***，充分混勻后，放置10min立即于510nm波長(zhǎng)，用光程為20mm比色皿，以水為參比，測(cè)量吸光度。經(jīng)空白校正后，繪制吸光度對(duì)*含量(mg)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。3．水樣的測(cè)定：分取適量的餾出液放入50ml比色管中，稀釋至50ml標(biāo)線。用與繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的步驟測(cè)定吸光度，*后減去空白實(shí)驗(yàn)所得吸光度。4．空白試驗(yàn)：以水代替水樣，經(jīng)蒸餾后，按水樣測(cè)定步驟進(jìn)行測(cè)定，以其結(jié)果作為水樣測(cè)定的空白校正值。五、計(jì)算揮發(fā)酚(以*計(jì)，mg/l)=1000×m/v式中：m——由水樣的校正吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的*含量（mg）；v——移取餾出液體積(ml)。注意事項(xiàng)如水樣含揮發(fā)酚較高，移取適量水樣并加至250ml進(jìn)行蒸餾，則在計(jì)算時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
您可能會(huì)對(duì)本公司的以下產(chǎn)品感興趣：
定氮儀∣全自動(dòng)凱氏定氮儀∣索氏抽提器∣索氏抽提儀∣蛋白質(zhì)測(cè)定儀∣馬弗爐∣可見分光光度計(jì)∣紫外可見分光光度計(jì)∣火焰分光光度計(jì)∣水分測(cè)定儀∣水份測(cè)定儀∣火焰光度計(jì)∣電子天平∣旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器∣索氏提取儀∣超級(jí)恒溫槽∣低溫恒溫槽∣分光光度計(jì)∣電導(dǎo)率測(cè)定儀∣ph計(jì)∣旋轉(zhuǎn)式粘度計(jì)∣氮磷鈣測(cè)定儀∣白度測(cè)定儀∣旋光儀∣阿貝折射儀∣白度儀∣紫外分光光度計(jì)∣比較測(cè)色儀∣旋轉(zhuǎn)式粘度計(jì)∣旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀∣纖維素測(cè)定儀∣箱式電阻爐∣凱氏定氮儀∣脂肪測(cè)定儀∣粗纖維測(cè)定儀∣索氏提取器∣快速水分測(cè)定儀∣消化爐∣水分快速測(cè)定儀∣凱式定氮儀∣羅維朋比色計(jì)∣馬福爐∣粉碎機(jī)∣脂肪測(cè)定儀∣全自動(dòng)凱式定氮儀∣水份快速測(cè)定儀∣消煮爐∣快速水份測(cè)定儀∣粗纖維測(cè)定儀∣粗脂肪測(cè)定儀∣全自動(dòng)定氮儀
上一篇：潛水泵的故障現(xiàn)象及排除方法
下一篇：蛋白質(zhì)的化學(xué)反應(yīng)及與食品成分的相互作用