糖發(fā)酵實驗內(nèi)容與原理及操作方法與步驟！
一、實驗?zāi)康囊?br>1、了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細(xì)菌鑒定中的重要作用。
2、掌握通過糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法。
二、實驗內(nèi)容與原理
糖發(fā)酵試驗是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng)，在腸道細(xì)菌的鑒定上尤為重要。絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們在分解糖類物質(zhì)的能力上有很大的差異。有些細(xì)菌能分解某種糖產(chǎn)生有機酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫氣、甲烷、二氧化碳等)；有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。例如大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣；傷寒桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不能分解乳糖；普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不能分解乳糖。發(fā)酵培養(yǎng)基含有蛋白胨，指示劑(溴甲酚紫)，倒置的德漢氏小管和不同的糖類。當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時，溴甲酚紫指示劑可由紫色(ph6.8)變?yōu)辄S色(ph5.2)。氣體的產(chǎn)生可由倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。
三、主要儀器與設(shè)備
1、菌種 大腸桿菌，產(chǎn)氣桿菌斜面各一支。
2、培養(yǎng)基 葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管各3支(內(nèi)裝有倒置的德漢氏小管)。
3、儀器或其他用具 試管架，接種環(huán)等。
四、操作方法、實驗步驟
1、用記號筆在各試管外壁上分別標(biāo)明發(fā)酵培養(yǎng)基名稱和所接種的細(xì)菌菌名。
2、取葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管2支，分別接入大腸桿菌，產(chǎn)氣桿菌。另取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管2支，同樣分別接入大腸桿菌，產(chǎn)氣桿菌。
在接種后，輕緩搖動試管，使其均勻，防止倒置的小管進(jìn)入氣泡。
3、將接種過4支試管均置37℃培養(yǎng)24~48 h。
4、觀察各試管顏色變化及德漢氏小管中有無氣泡。
五、實驗結(jié)果（現(xiàn)象）與分析
請對實驗結(jié)果做以分析。
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