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HILIC色譜柱的清洗溶劑選擇看過(guò)來(lái)!

發(fā)布時(shí)間:2024-09-22
一般而言,hilic色譜柱用淋洗液保存即可。若需要長(zhǎng)時(shí)間保存,需要向柱內(nèi)泵入3%硼酸溶液,然后取下柱子,用無(wú)孔接頭將柱子兩端堵死,放在通風(fēng)干燥處保存。短時(shí)間不用,建議每周開(kāi)機(jī)一次。當(dāng)色譜柱被玷污后,柱效會(huì)有所下降,保留時(shí)間縮小,分離度下降。清洗時(shí),將色譜柱與抑制器分離,讓廢液直接排出流速不宜過(guò)快1ml/min即可,每次清洗后,應(yīng)該用去離子水沖洗10分鐘以上,再用淋洗液平衡系統(tǒng)。
hilic色譜柱的清洗應(yīng)該用哪種溶劑呢?
建議使用有機(jī)溶劑乙腈來(lái)清潔c18或者c8、硅基hplc色譜柱。thf是一種強(qiáng)倒相有機(jī)溶劑,很難從疏水性鍵合相上清除,從而導(dǎo)致色譜可變性,不宜使用。大多數(shù)情況下,乙腈這種強(qiáng)溶劑足以清除日常使用期間聚積在色譜柱上的樣品和流動(dòng)相成分。
然而用有機(jī)溶劑清潔色譜柱之前,一定要保證已經(jīng)清除流動(dòng)相和色譜柱中可能殘留的緩沖鹽,這可以避免這些鹽在色譜柱中沉淀。
為此事先應(yīng)確保流動(dòng)相中沒(méi)有緩沖鹽,然后用這種混合物(15-20倍柱體積)沖洗色譜柱。也就是說(shuō),如果流動(dòng)相是50%乙腈和50%50mm磷酸鹽緩沖液,那么首先應(yīng)該用50/50(v/v)乙腈和水的混合溶液來(lái)清除緩沖鹽。接著建議用30-40倍柱體積的純乙腈*沖洗色譜柱。如果認(rèn)為色譜柱頂部可能有微粒,應(yīng)該考慮從檢測(cè)器上拆下色譜柱并反轉(zhuǎn)流向,然后再開(kāi)始清潔步驟。不要把色譜柱重新連接到檢測(cè)器上,可以把清潔溶劑收集到一個(gè)有傾口的燒杯中。
*儲(chǔ)存色譜柱時(shí)一般都建議使用乙腈,按照上述步驟清潔之后,可方便地儲(chǔ)存色譜柱。準(zhǔn)備重新使用這個(gè)儲(chǔ)存的溶劑時(shí),記住一定要用不含緩沖鹽的流動(dòng)相沖洗色譜柱,然后再引入緩沖后的流動(dòng)相,這能再次降低鹽沉淀的可能性。
不*用洗滌劑來(lái)清潔反相(rp)hilic色譜柱。離子洗滌劑通常是一端帶一個(gè)離子化基團(tuán)的長(zhǎng)鏈碳化合物,一般用作離子配對(duì)試劑。因?yàn)檫@些長(zhǎng)碳鏈能與反相色譜柱的鍵合相很牢固地結(jié)合起來(lái)(如c18反相色譜柱的鍵合相能牢固地保留洗滌劑的長(zhǎng)碳鏈),因此很難清除。
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