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GSK Elisa Kit在使用中的那些要求

發(fā)布時(shí)間:2024-09-06
gsk elisa kit應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人骨特異性堿性磷酸酶水平。用純化的人骨特異性堿性磷酸酶抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入骨特異性堿性磷酸酶,再與hrp標(biāo)記的骨特異性堿性磷酸酶抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物tmb顯色。tmb在hrp酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的骨特異性堿性磷酸酶呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(od值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人骨特異性堿性磷酸酶濃度。
gsk elisa kit使用要求如下:
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。
gsk elisa kit嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
關(guān)鍵詞:酶標(biāo)儀
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