副溶血性弧菌(vibrio parahaemolyticus)是一種嗜鹽性革蘭氏陰性無芽孢菌,它主要棲息于近海海洋和河口環(huán)境,在各類海產(chǎn)品中廣泛存在。由于海產(chǎn)品運(yùn)輸和銷售造成的交叉污染,在淡水產(chǎn)品中也可被大量檢出。副溶血性弧菌的感染可導(dǎo)致人類發(fā)生多種不同的疾病,包括傷口感染、敗血癥和急性胃腸炎,常見的是引起人類的急性胃腸炎。
副溶血性弧菌之所以能導(dǎo)致人類腹瀉與致病因子有關(guān),包括病原菌初始黏附定殖宿主細(xì)胞,病原菌釋放對宿主細(xì)胞具有各種生物活性的毒素、蛋白質(zhì)、多糖等產(chǎn)物,發(fā)揮毒性作用有關(guān)。通常把產(chǎn)耐熱直接溶血素和耐熱相關(guān)溶血素毒力因子,導(dǎo)致發(fā)生感染腹瀉的菌株稱為致病株。
感染發(fā)生之初,細(xì)菌選擇性的在宿主細(xì)胞表面接觸停留并定居繁殖是活化和分泌毒素*的步驟。早期的研究發(fā)現(xiàn),副溶血性弧菌的菌毛在黏附、定殖腸道具有重要作用。無論 kp 是否陽性的臨床株通常都具有很強(qiáng)的粘附能力,而從海產(chǎn)品中分離出的 kp陰性菌株,其附著能力就較弱。
迄今為止,*的副溶血性弧菌重要的毒力因子就是耐熱直接溶血素(tdh)和耐熱相關(guān)溶血素(trh),它們分別由 tdh、trh 基因編碼。調(diào)查發(fā)現(xiàn),幾乎所有臨床分離的副溶血性弧菌都產(chǎn)某種具有生物活性的蛋白:tdh 或 trh。產(chǎn) tdh 菌株直接的表征就是在我萋血平板上出現(xiàn) β 型溶血,即神奈川現(xiàn)象陽性(kp+),這被作為菌株是否具致病性主要的標(biāo)記。
食品質(zhì)檢部門檢測各類海產(chǎn)品中副溶血性弧菌的檢測,通常采用國標(biāo)gb 4789.7—2013食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 副溶血性弧菌檢驗(yàn)方法,包括樣品制備、增菌、分離、純培養(yǎng)、初步鑒定、確定鑒定等步驟。
分離副溶血性弧菌,可選用顯色培養(yǎng)基。顯色培養(yǎng)基是在傳統(tǒng)培養(yǎng)基制作基礎(chǔ)上,添加了新型組合式特異性發(fā)色酶底物,當(dāng)細(xì)菌生長代謝過程中產(chǎn)生的特異性酶分解特異性發(fā)色底物后,目標(biāo)菌形成不同顏色的菌落,從而對目標(biāo)菌得到快速的分離和鑒別,同時(shí)也可以進(jìn)行計(jì)數(shù)。
那么如何選擇好用的顯色培養(yǎng)基呢?締一生物*您使用himedia公司(微生物生產(chǎn)商)弧菌顯色培養(yǎng)基(貨號(hào):mv1682)。
我們知道傳統(tǒng)使用的弧菌分離培養(yǎng)基是tcbs瓊脂,但蔗糖發(fā)酵菌會(huì)影響tcbs瓊脂上弧菌的鑒定,在himedia公司hicrome弧菌顯色培養(yǎng)基上,弧菌的顯色并不受到其他細(xì)菌菌落的影響。這是因?yàn)椋?xì)菌β-半乳糖苷酶和培養(yǎng)基中所包含底物的反應(yīng)發(fā)生顯色反應(yīng),副溶血性弧菌呈藍(lán)綠色。與此同時(shí),還可以分離出霍亂弧菌,霍亂弧菌在該培養(yǎng)基上呈紫色,且該培養(yǎng)基的成分*符合國標(biāo)中對副溶血性弧菌中的顯色培養(yǎng)基的規(guī)定,主要成分如下:
在35-37℃溫育18-24小時(shí)后觀察到的培養(yǎng)特征。
有機(jī)體
接種(cfu)
生長
恢復(fù)率
菌落顏色
糞腸球菌atcc 29212
≥103
抑制
0%
大腸桿菌atcc 25922
≥103
抑制
0%
*atcc 25923
≥103
抑制
0%
霍亂弧菌atcc 15748
50-100
好—旺盛
≥50%
紫色
副溶血性弧菌atcc 17802
50-100
好—旺盛
≥50%
藍(lán)綠色
副溶血性弧菌引起的感染腹瀉無論是感染率還是患病人數(shù)以及對社會(huì)造成的疾病負(fù)擔(dān)大有取代沙門等傳統(tǒng)病原菌的趨勢,這是許多因素造成的綜合結(jié)果,但究其原因主要的是對副溶血性弧菌沒能引起足夠的重視,缺乏更深層次的研究和報(bào)道,包括致病機(jī)制研究,進(jìn)化傳播研究,風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,疾病負(fù)擔(dān)以及宣傳教育等。隨著社會(huì)的發(fā)展,副溶血性弧菌的分離、檢測等操作越來越可行,這可為更深入研究副溶血性弧菌致病機(jī)制,為疫苗的開發(fā)、藥物的選擇以及行之有效的防治手段和方法提供新手段和思路。
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