活化部分凝血活酶時(shí)間(aptt)試劑盒樣本的要求
預(yù)期用途:
用于科研實(shí)驗(yàn)中血漿中活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定。
檢測(cè)原理:
待測(cè)血漿加入部分凝血活酶溶液,在ca參與下纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄岳w維蛋白,測(cè)定
凝固所需的時(shí)間,即為待測(cè)血漿活化部分凝血活酶時(shí)間
樣本要求:
靜脈釆血,置于含有1/10體積0.109mol/l枸櫞酸鈉抗凝液(1份抗凝液+9份全血)的塑料管或硅化玻璃管中,輕輕顛倒混勻,3000rpm(或2500g)離心15分鐘,收集上層液(血漿,黃色)。
2.采血必須使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器,貯血必須使用塑料試管或硅化玻璃管。不宜使用普通玻璃器,避免凝血因子活化。
3.采血時(shí)止血帶不可束縛過緊,而且不應(yīng)超過5分鐘,否則導(dǎo)致凝血及纖溶因子活化。
4.不宜使用edta•na2、肝素、草酸鹽作為抗凝劑。
5.紅細(xì)胞比容超過55%或小于20%時(shí),應(yīng)調(diào)整抗凝劑用量??鼓齽w積(ml)=0.00185×血液體積(m1)×(100—比容)。
6.樣本采集避免溶血及組織液污染。
7.樣本在不同條件下可保存時(shí)間如下:+2~+8℃保存,不宜超過6小時(shí);+22~+24℃保存,不宜超過2小時(shí)測(cè)定。
8.樣本暴露于空氣中可使ph值升高,因此若不能立即測(cè)定,應(yīng)將樣本加塞保存。
檢驗(yàn)方法: 1.試劑使用前請(qǐng)振搖均勻
2.半自動(dòng)凝血儀、手工測(cè)定
(1)取待測(cè)血漿0.1m1,加入37℃預(yù)溫aptt試劑0.1ml,37℃孵育5min
(2)加入37℃預(yù)溫0.025 mol/l cacl2溶液0.1ml,記錄凝固時(shí)間。
3.全自動(dòng)凝血儀/全自動(dòng)生化分析系統(tǒng)測(cè)定
請(qǐng)按儀器提供的參數(shù)操作。
參考區(qū)間: 人22~38秒(n=200,x±2sd作為參考區(qū)間的上、下限。)
各實(shí)驗(yàn)室可建立自己的參考區(qū)間
檢驗(yàn)結(jié)果的解釋: 1.樣本內(nèi)若有殘留細(xì)胞,經(jīng)凍融后細(xì)胞膜受破壞可影響結(jié)果
2.測(cè)定溫度36.5~38.5℃,過低或過高溫度均使aptt延長(zhǎng)。
3.口服避孕藥、雌激素、妊娠類藥物、肝素、天冬酰胺酶、納絡(luò)酮可影響aptt。
4.當(dāng)測(cè)定結(jié)果出現(xiàn)異常時(shí),應(yīng)檢查檢測(cè)系統(tǒng)的每個(gè)組成,如試劑、樣本、質(zhì)控、儀器等,必要時(shí)重新測(cè)定。