層析分離技術(shù)是我?！渡治鰧?shí)驗(yàn)》中的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)。70年代后期內(nèi)研制的“核酸蛋白檢測(cè)儀”，使用某波長(zhǎng)（280nm或254nm等）進(jìn)行定性檢測(cè)分離，用記錄儀描譜，長(zhǎng)期在校實(shí)驗(yàn)室使用。在我科技人員努力下，近年來(lái)，市場(chǎng)上相繼出現(xiàn)了可代替記錄儀的“電腦采集器”、“電腦核酸蛋白檢測(cè)儀”、“雙波長(zhǎng)電腦核酸蛋白檢測(cè)儀”、“層析-電導(dǎo)聯(lián)用系統(tǒng)”等產(chǎn)品，迅速應(yīng)用到教學(xué)實(shí)驗(yàn)、科學(xué)研究和**生產(chǎn)域。
、檢測(cè)原理
所有紫外吸收檢測(cè)器工作原理都是基于光的吸收定律---朗伯-比耳定律。該定律指出，當(dāng)束單色光(λ)輻射通過(guò)稀濃度物質(zhì)溶液時(shí)，如果溶劑不吸收光，則液體的吸光度與吸光物質(zhì)的濃度和光經(jīng)過(guò)溶液的距離成正比。其關(guān)系式為：
a(λ)=a(λ)bc
a=-lgt=lg1/t
、層析裝置分類：
按描譜方式分有：記錄儀描譜和電腦描譜（外加采集分析器）
按檢測(cè)波長(zhǎng)分有：?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)檢測(cè)和雙波長(zhǎng)（多波長(zhǎng)）同步檢測(cè)
按檢驗(yàn)器分有：核酸蛋白檢測(cè)和核酸蛋白檢測(cè)、電導(dǎo)檢測(cè)聯(lián)用
三.傳統(tǒng)檢測(cè)儀：
傳統(tǒng)層析實(shí)驗(yàn)裝置由單波長(zhǎng)核酸蛋白檢測(cè)儀（外加電腦采集器或?qū)㈦娔X采集器裝入檢測(cè)儀中也屬此類）、層析柱、恒流泵、部分收集器和記錄儀等部件構(gòu)成。用種波長(zhǎng)（如280nm或254nm等）下對(duì)已知物質(zhì)（蛋白或核酸等）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，校實(shí)驗(yàn)室的層析實(shí)驗(yàn)裝置大多屬于此類。特點(diǎn)如下：
1、檢測(cè)前必須選定種波長(zhǎng)（280nm、254nm）進(jìn)行檢測(cè)，利用物質(zhì)特征波長(zhǎng)分離已知組分。
2、要求學(xué)生在檢測(cè)前定要先調(diào)整透過(guò)率為，然后再調(diào)整吸光度為0。學(xué)生經(jīng)常會(huì)問(wèn)：雖然透過(guò)率和吸光度在此點(diǎn)（t=，a=0）符合了a=lg(1/t)關(guān)系，但怎樣保證在測(cè)量范圍內(nèi)都符合朗伯--比爾定律？
3、傳統(tǒng)檢測(cè)儀為保證測(cè)量讀數(shù)落在儀器有效測(cè)量范圍內(nèi)，在儀器面板上都設(shè)有靈敏度選擇裝置（2.0a、1.0a、0.5a、0.2a、0.1a、0.05a等）。因此，測(cè)量前要選擇合適的靈敏度；②真正吸光度值是儀器顯示數(shù)與靈敏度的乘積；③測(cè)量中不要改變靈敏度，否則可能會(huì)帶來(lái)基線變化。
4、傳統(tǒng)檢測(cè)儀在不同靈敏下的測(cè)量結(jié)果均為0-10mv直流信號(hào)，將此信號(hào)輸出到記錄儀或電腦采集器。顯然，記錄紙或電腦屏上的吸光度也并非樣品實(shí)際的吸光度，也應(yīng)受到儀器靈敏度的調(diào)制。
四、新型檢測(cè)儀
以對(duì)蛋白、核酸、肽等生物大分子物質(zhì)的檢測(cè)、分離和純化為目的，新型層析實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中的電腦核酸蛋白檢測(cè)系統(tǒng)具有以下特點(diǎn)：
1、系統(tǒng)智能調(diào)整吸光度到0.000，透光率到。，并在測(cè)量范圍內(nèi)的吸光度和透過(guò)率嚴(yán)格符合a=lg(1/t)。
2、單波長(zhǎng)檢測(cè)或雙波長(zhǎng)同步檢測(cè)。
3、系統(tǒng)自帶數(shù)據(jù)采集工作站，檢測(cè)、采集、軟件工作站體化系統(tǒng)集成。分析軟件具有實(shí)時(shí)描譜、分析參數(shù)、圖譜保存、圖譜打印、圖譜編輯等功能，峰、峰寬、峰面積、歸化、保留時(shí)間、半峰寬、峰底寬、面積含量、純度、層析柱分辯率等參數(shù)。
近出現(xiàn)的“單波長(zhǎng)核酸蛋白檢測(cè)_電導(dǎo)檢測(cè)聯(lián)用系統(tǒng)”、“雙波長(zhǎng)核酸蛋白檢測(cè)_電導(dǎo)檢測(cè)聯(lián)用系統(tǒng)”和“三波長(zhǎng)核酸蛋白檢測(cè)電導(dǎo)檢測(cè)聯(lián)用系統(tǒng)”等產(chǎn)品，為科學(xué)研究、尋找目標(biāo)物分離條件和提工作效率了新方法。
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