液相色譜在藥物分析中的應(yīng)用,主要考慮試樣的預(yù)處理和分析柱、檢測器的選擇。在試樣的預(yù)處理上,日前興起的固相(微)萃取使得許多含量低的成分得到精制提純,從而適于液相色譜的測定,而采用逆流萃取測定川芎嗪含量取得了好的效果。中藥中有些紫外吸收弱,或無特征紫外吸收的成分,直接用液相色譜測定,其靈敏度和分離度都不盡人意,利用柱前或柱后衍生化法可使這些成分較地測定出來。對于性大、脂溶性差物質(zhì),在ywgcl8柱上不易保留,用十二烷基磺酸鈉作為離子對試劑,降低其性,延長柱上的保留時(shí)間,取得較好的分離較果。將液相色譜和質(zhì)譜這兩個(gè)有力的分析技術(shù)在線連接在一起,經(jīng)過三十年的發(fā)展已成為一項(xiàng)較為成熟的分析手段,但是它從形成伊始就存在著問題:從液相色譜流進(jìn)質(zhì)譜時(shí),流動相的變化、溶劑的組成、溫壓離子化的問題制約著這種聯(lián)用技術(shù)發(fā)展,大氣壓離子化接口具有去除溶劑和離子化的雙重功效,它的引入,使得該技術(shù)在各個(gè)領(lǐng)域得到了的應(yīng)用。電噴霧離子源是一種軟電離技術(shù),一般只生成(m h) 和(m-h)-兩種分子離子峰,選擇性監(jiān)測(mz)190的負(fù)分子離子峰,具有較的靈敏度、度、一性,滿足了低濃度藥物研究的需求。由張莉等人研究的三維液相色譜法可以同步測定*和阿魏酸兩種指標(biāo)。通過實(shí)驗(yàn)證明:如果選擇合適的柱溫等色譜條件,乙醇作為反相液相色譜流動相,分析中藥及中成藥中成分,既安又。
結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì),普通的檢測器難以檢測出來,液相色譜-電化學(xué)法可以地測定黃連粉中僅差一個(gè)基團(tuán)的*和黃芩素的含量。樣品經(jīng)色譜柱分離后收集,再經(jīng)熒光分光光度計(jì)測熒光度,影響因素多,測定復(fù)雜,改進(jìn)后的液相色譜-熒光法則可以不經(jīng)衍生化和收集分離物,只經(jīng)化學(xué)處理除雜,濃縮后直接進(jìn)樣即可。用該法測定貫葉連翹中金絲桃素的含量也取得了較好的結(jié)果。
液相色譜-示差折光測*口服液中黃芪甲苷的含量也都取得了較為滿意的結(jié)果。對于只有紫外末端吸收,用紫外檢測時(shí)靈敏度低,基線易漂移,示差折光檢測其易受外界條件干擾,蒸發(fā)散射檢測器能克服以上不足,響應(yīng)值只與樣品質(zhì)量有關(guān),其信號相應(yīng)與質(zhì)量成正比,不同化合物,質(zhì)量相同則信號相應(yīng)基本一致。蒸發(fā)光散射檢測法是基于不揮發(fā)樣品分子對光的散射程度與其質(zhì)量成正比,與其所含基團(tuán)性質(zhì)無關(guān)。
只要選擇適當(dāng)?shù)臋z測器參數(shù),便可使流動相和溶劑*氣化,不產(chǎn)生信號,而樣品中的各個(gè)組分以不揮發(fā)粒子存在,對光有散射,以被檢測出來。因此,蒸發(fā)光散射檢測器可用于含不同基團(tuán)的多組分同時(shí)分離、分析。和紫外、熒光等方法相比,蒸發(fā)光散射檢測法對不同物質(zhì)有近似相同的響應(yīng)因子,因而不出現(xiàn)低濃度、響應(yīng)或濃度、低響應(yīng)的現(xiàn)象,有利于不同比例混合物的測定.液相色譜-蒸發(fā)光散射檢驗(yàn)法測定銀杏葉中萜類內(nèi)酯含量、紅參及育精膠囊中人參皂苷rg1和re的含量和藤黃中藤黃酸含量都得到了好的結(jié)果。