黑小麥含有大量人體所需的營養(yǎng)物質和微量元素，是重要的黑色谷物資源。黑小麥中γ-氨基丁酸（gaba）具有促進記憶力、降壓、改善腦活力、緩解焦慮和頭痛等功能。以氯化鈣、氯化鈉分別做培養(yǎng)液，使黑小麥處于鹽脅迫環(huán)境中，可能會使黑小麥中gaba含量提高，以實現(xiàn)gaba富集。同時有研究表明，酸性電解水可促進谷物發(fā)芽過程中某些生物活性物質的積累。用微酸性電解水處理黑小麥，可能會在殺菌消毒、gaba含量富集方面發(fā)揮積極作用。
本文實驗以運黑161為材料，采用微酸性電解水浸泡處理，將磷酸吡哆醛、氯化鈣、氯化鈉等培養(yǎng)組分列為考察因素，做一系列單因素試驗，確定考察因素對黑小麥gaba的影響，以便為黑小麥功能性產(chǎn)品開發(fā)提供理論支持。
1、材料
運黑161、gaba標準品
2、儀器與設備
高速離心機、恒溫培養(yǎng)箱、真空冷凍干燥機、上海元析uv-9000s紫外可見分光光度計
實驗部分
1、黑小麥芽的制備
挑選籽粒飽滿、無蛀蟲、無霉爛的“運黑161”，分別稱取25.0±0.01g該黑小麥種子于100ml燒杯中。用自制微酸性電解水（ph5.55、有效氯濃度22.4mg/l）對種子浸泡消毒1h。用相應培養(yǎng)液以料液比1:2對種子浸泡8h，將浸泡后的種子均勻平鋪在底部有孔的發(fā)芽盒中，于恒溫箱（20℃）進行避光培養(yǎng)。培養(yǎng)期間每天用相應培養(yǎng)液淋澆3次，對照組用等量去離子水淋澆，培養(yǎng)5天后進行采收。
2、培養(yǎng)液成分對黑小麥芽gaba含量的影響
2.1培養(yǎng)液制備
配置質量濃度分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mg/ml鈉溶液，濃度分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mmol/l氯化鈣溶液，濃度分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mmol/l磷酸吡哆醛溶液，濃度分別為5、50、100、150、200、250mmol/l氯化鈉溶液。采收后的黑小麥芽速凍后于真空冷凍干燥機中進行凍干，磨成粉狀后于4℃冰箱貯存?zhèn)溆谩?br>2.2標準曲線建立
配置不同濃度的gaba標準溶液，各取1ml，分別加入0.60ml 0.20mol/l硼酸鹽緩沖液，搖勻后加入2ml5%溶液，搖勻，加入1ml7%次氯酸鈉溶液混勻，用沸水加熱5min，直到溶液變?yōu)樗{綠色，將其放入碎冰中冷卻至室溫。用紫外分光光度計在645nm處測定吸光度并繪制標準曲線。
2.3樣品gaba含量的測定
準確稱取0.50g黑小麥芽粉樣品，加5ml蒸餾水，在往復振蕩器震蕩提取4h，上層清液于10000r/min離心3min。用移液槍取1ml上層清液于10ml容量瓶中，按測定標準品的方法在光度計波長645nm處測定樣品中gaba含量。
實驗結果
1、濃度對發(fā)芽黑小麥gaba含量的影響
2、氯化鈣濃度對發(fā)芽黑小麥gaba含量的影響
3、磷酸吡哆醛濃度對發(fā)芽黑小麥gaba含量的影響
4、氯化鈉濃度對發(fā)芽黑小麥gaba含量的影響
關鍵詞：高速離心機 恒溫培養(yǎng)箱 冷凍干燥機 分光光度計 恒溫箱