紅掌,是天南星科花燭屬多年生常綠植物,葉革質(zhì)光亮,單花頂生,花期長(zhǎng)達(dá)1個(gè)半月左右。利用常規(guī)播種、分株法繁殖切花紅掌,繁殖率極低,播種繁殖所需時(shí)間長(zhǎng),且易產(chǎn)生變異。利用組織培養(yǎng)快速繁殖切花紅掌,可滿足市場(chǎng)的大量需求。
材料與方法
材料來(lái)源為河南濮陽(yáng)世錦公司自行選育的優(yōu)質(zhì)紅掌切花品種。
外植體滅菌處理取切花紅掌的幼嫩葉片及葉柄作為供試材料,首先在流水下沖洗1小時(shí),同時(shí)用毛刷輕輕刷洗,在消毒前先將葉片切成1.5cm×1.5cm左右的小片,將葉柄切成1.5cm左右長(zhǎng)的小段,將其放入滅過(guò)菌的廣口瓶中,用75%酒精浸泡30秒后,再用0.1%hgcl2浸泡消毒8分鐘,用無(wú)菌水沖洗5次,在無(wú)菌紙上把葉片切成1cm×1cm左右的小片,葉柄切成1cm左右的小段,接種在滅過(guò)菌的培養(yǎng)基上,所有無(wú)菌操作必須在超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。
培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件基本培養(yǎng)基為ms加蔗糖30g/l、瓊脂6g/l,ph值5.8。在不同培養(yǎng)階段添加不同種類(lèi)和濃度的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,培養(yǎng)溫度為25℃±1℃,光照強(qiáng)度2000~3000lux,每日光照14小時(shí)。
結(jié)果與分析
不同外植體脫分化程度比較將2種不同外植體分別接種于ms+6-ba1.5+naa0.7的同一培養(yǎng)基上,培養(yǎng)3周后,葉片外植體首先明顯膨大,長(zhǎng)出愈傷組織塊,5周后,葉片外植體都長(zhǎng)出了愈傷組織塊。觀察發(fā)現(xiàn)2種不同外植體都能被誘導(dǎo)出愈傷組織,只是葉片較容易被脫分化。
6-ba對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影響將消過(guò)毒的葉片接種于加有不同濃度6-ba的ms+6-ba+naa0.7的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),觀察不同濃度6-ba對(duì)葉片外植體愈傷組織誘導(dǎo)的影響。由表2可看出,不同濃度的6-ba對(duì)切花紅掌葉片的誘導(dǎo)有明顯不同。在無(wú)6-ba的培養(yǎng)基上,不能誘導(dǎo)出愈傷組織。當(dāng)6-ba濃度低于1.5mg/l時(shí),隨著6-ba濃度的增大,愈傷組織誘導(dǎo)率及增殖率都隨之增大;而較高濃度的6-ba又抑制了愈傷組織的誘導(dǎo)及增殖。當(dāng)6-ba為1.5mg/l時(shí),愈傷組織誘導(dǎo)率及增殖率都達(dá)到最大,效果最好。因此ms+6-ba1.5+naa0.7對(duì)切花紅掌是較理想的誘導(dǎo)培養(yǎng)基。6-ba對(duì)愈傷組織分化增殖的影響將誘導(dǎo)成功的愈傷組織塊分別轉(zhuǎn)接到含不同濃度6-ba的分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化培養(yǎng),觀察不同濃度外源激素6-ba對(duì)愈傷組織分化產(chǎn)芽的影響。
由表3可見(jiàn),不同濃度的6-ba對(duì)切花紅掌愈傷組織的分化具有明顯不同的效應(yīng)。隨著低濃度6-ba濃度的增大,芽的分化率及產(chǎn)芽量都隨之增大。當(dāng)6-ba達(dá)1.0mg/l以上時(shí),明顯抑制了芽的分化,加速了愈傷組織的生長(zhǎng);當(dāng)6-ba為0.5mg/l時(shí),芽分化率達(dá)最高為91.43%,芽的生長(zhǎng)速度也最快。將布滿叢芽的愈傷組織切成小塊,進(jìn)行繼代培養(yǎng),每30天繼代一次,可達(dá)到工廠化生產(chǎn)的目的。
生根培養(yǎng)從叢芽中切取2~3cm長(zhǎng)的單芽接種于生根培養(yǎng)基中,經(jīng)過(guò)15天的培養(yǎng),觀察其在不同培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況。
由表4可看出,naa和iba0.2mg/l對(duì)切花紅掌生根都有很好的促進(jìn)作用。前者根的形態(tài)為粗短,后者為細(xì)長(zhǎng),但naa價(jià)格較iba低,所以1/2ms+naa0.2mg/l作為切花紅掌的生根培養(yǎng)基的首選。
試管苗移栽取生根良好的試管苗,用水把苗基部的培養(yǎng)基清洗干凈,栽入草炭與珍珠巖1∶1的基質(zhì)中,澆透水,放到遮蔭的溫棚內(nèi),溫度保持在18℃~25℃之間,保持周?chē)鷿穸?0%左右,經(jīng)過(guò)精心管理,2周后,試管苗移栽成活率一般可達(dá)90%。經(jīng)過(guò)多次移栽試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),保持小苗周?chē)諝鉂駶?rùn),通氣良好且保濕良好的栽培基質(zhì)以及適宜的溫度是切花紅掌試管苗移栽成功的關(guān)鍵。
討論
在切花紅掌的組織培養(yǎng)過(guò)程中,首先誘導(dǎo)產(chǎn)生優(yōu)質(zhì)愈傷組織,分化出芽點(diǎn)多的優(yōu)良無(wú)性系作為快繁材料,這樣就能在短時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)大量?jī)?yōu)質(zhì)種苗。
從培養(yǎng)基移栽入土,是從異養(yǎng)到自養(yǎng)的轉(zhuǎn)變。試管異養(yǎng)條件是在無(wú)菌、高濕、低光照、溫度穩(wěn)定的環(huán)境中生長(zhǎng),而溫室是相對(duì)干燥、強(qiáng)光、溫差大的環(huán)境,因此,在試管苗移栽馴化期,要根據(jù)切花紅掌的生理特點(diǎn)及試管苗特點(diǎn)選擇透氣、保溫好、適合切花紅掌生長(zhǎng)的移栽基質(zhì),要保證適宜的溫度和濕度,創(chuàng)造良好的生長(zhǎng)環(huán)境,減少病蟲(chóng)害,提高移栽成活率。
眾所周知,高濃度的細(xì)胞分裂素會(huì)造成植株的不可預(yù)知變異,在上述組培快繁技術(shù)中所用分裂素濃度雖未引起明顯變異,但濃度大小一定要合適。